植物原生质体悬液碎片高怎么办?
植物原生质体悬液碎片高怎么办?听我给你炫一炫!
随着单细胞技术的成熟,小编一直以为市场上推植物单细胞的公司和我们开泰一样,是掌握了大多数植物组织的原生质体制备方案。直到今天,客户给我发了一张友商的原生质体悬液质检图,再拿出我们做的同植物同组织同时期的原生质体制备结果,真是没有对比就没有伤害!原来随技术成熟的是我们呀,哈哈~~~
客户转到我们这做了,开心!授人以鱼不如授人以渔,我们给老师提供更好原生质体制备结果的同时,也给老师分析了友商悬液中碎片产生的原因,对后续结果的影响,以及改进策略。
单细胞解离的过程中都会产生不同形态、数量的碎片,碎片的产生提示样本在解离过程中出现不同程度的细胞破碎,并释放核酸物质、细胞器等进入原生质体悬液。
碎片影响
碎片、杂质会对下游实验造成哪些影响呢?
1、计数误差。核酸物质和细胞器等造成荧光背景较高,影响计数效果,导致上机细胞数产生偏差,进而影响捕获细胞数;
2、形状不规则的碎片会在油包水的过程中提高堵孔风险,造成GEMs生成失败;
3、核酸物质会缠绕碎片、细胞、细胞器形成大的细胞团块,提高结团率,造成油包水堵孔或者多胞率提高;
4、一般有较多碎片也提示整体样本质量差,核酸物质可能已经有降解,数据质量会较差。
碎片去除
既然碎片对下游实验有这么大的影响,如何避免碎片的产生,或去除碎片呢?
1、样本本身不健康,导致细胞容易破损、整体样本质量差。PS:这种情况需要尽量选取新鲜、健康的样本。
2、解离过程强度过大,细胞受到损伤导致的碎片较多。PS:可以采取适当减弱酶强度、暗处解离、选取正确的离心转速、温柔的吹打方式等来减少损伤。
3、样本本身结构特殊带来的碎片较多。比如木质化程度较高的根茎、导管结构丰富的叶脉和茎等,这类碎片大多会有比较典型的特征辅助判断,比如脉管结构释放的螺纹状碎片。PS:这些碎片是伴随样本解离过程不断释放的,可以通过差速离心、密度梯度离心等方式尽量去除,但大多数情况无法去除干净。
最棒的研发,最强的后援
别问小编为什么知道这么多?既然你好奇,就告诉你吧:我有强大的后援团!自推出以来,我们公司植物单细胞项目的原生质体制备成功率出奇的高(经我手的项目还没失败过),抱着无比好奇的心态,问了实验研发老师,不问不知道,一问吓一跳,研发成本也是出奇的高!
虽然有些材料种不好,但不妨碍他们的研发进度,春回大地,取之不尽的科研材料供我们优化解离方案。加油吧,我们最棒的研发团队!相信按照这套研发流程,多少物种多少组织我们都能攻克。最后来一句:活该我们专业!!!哈哈~~~我骄傲!
解离经验
随着春去夏来,我们制备过原生质体的植物组织已经不止下图中展示的这些了,但是还是想给你看看这张旭日东升图,就像植物单细胞技术,正冉冉升起!
同样想给你看的的还有我们的单细胞(核)悬液质检图,每一幅质检图都是我们骄傲的足迹。欢迎各位老师垂询,每位老师都有机会获得样本的免费解离测试机会哦~
最后再放我们的产品一览图,主打全链条产品搭配,一站式科研服务!
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