常见问题
Q1: 10X单细胞转录组和10X ATAC可以做哪些关联分析?
A:1)分群的关联,直接将转录组的分群映射到ATAC细胞分群中;
2)基因组开放区域和下游基因表达的关联;
3)开放区域的时序关系和基因表达的时序关系的关联(拟时分析)。
Q2: 10x ATAC有生物学重复样本怎么分析?
A:对于生物学重复的样本,我们会对每个生物学样本的peak进行组内合并。合并peak的方式一般有两种,分别是取交集,以及取并集。
多数基因组中的染色质都紧紧盘绕在细胞核内,但也有一些区域经染色质重塑后呈现出松散的状态,这部分无核小体的裸露DNA区域被称为开放染色质(open chromatin),而DNA复制和基因转录都发生在这些区域。染色质的这种特性叫做染色质的易接近性(chromatin accessibility),通过研究细胞特定状态下开放的染色质区域可以在DNA水平上了解其转录调控。 10x Gennomics单细胞ATAC-seq(Single Cell Assay for Transposase Accessible Chromatin with high-throughput sequencing,单细胞染色质易开放区域测序)基于GemCode微流体平台,利用Tn5转座酶切割染色质的开放区域,并加上测序引物进行高通量测序,以高分辨率研究染色质开放区域,为成千上万个单细胞提供全面的染色质调控图谱。
应用领域
1. 发现表观遗传变异引起的细胞异质性;
2. 构建基因表达上游的基因调控网络;
3. 定义细胞类型和分化状态;
4. 预测疾病分子标志物。
技术路线
分析内容
标准信息分析 (需提供参考基因序列、参考基因组序列及基因注释结果) | 定制化信息分析 |
1. 数据分析与质控:测序数据基本质控、样本基本信息结果统计; 2. 比对分析:测序饱和度分析、插入片段长度分布; 3. Peak分析:peak信息统计、TSS周围信号分布、peak区域片段分布统计; 4. 单细胞亚群分类与分类结果可视化:细胞亚群聚类、分类结果可视化(TSNE图); 5. Peak注释:peak相关基因注释、peak相关基因GO/KEGG功能富集分析; 6. TF motif富集分析; 7. 亚群染色质易接近性差异分析; 8. 核心转录因子调控网络。
| 和10x Genomics 转录组关联分析。 |