高效原生质体制备!植物单细胞研究不抽核!
高效原生质体制备!植物单细胞研究不抽核!
6月已过半,高考落幕,中考持续,苦读多年,考生们交卷的时刻到了,祝各位考生金榜题名,暑期过后迎来新的生活!
宝剑锋从磨砺出!考生们如此,开泰单细胞研发团队亦是如此!本着严谨的科研态度,开泰研发专项小组内部历时两年多,解离了上千例组织样本,汇总经验。推出单细胞产品以来,依靠丰富的组织解离经验,根据物种及组织部位制定针对性的解离方案,开泰实验团队稳定高效的完成了大多数组织样本的单细胞解离,获得客户一致好评!
在最难的植物单细胞原生质体制备方面,开泰单细胞研发团队也取得巨大进展,在别家服务商给老师推荐单细胞提核时,开泰有底气承诺进行原生质体制备!这份底气是单细胞研发团队给的,是经过两年700多个日夜不断摸索、失败再尝试、优化再优化积累的!
基于此,开泰可以可以自豪的宣传:高效原生质体制备,植物单细胞研究不抽核!欢迎各位老师砸单,开启您的植物单细胞研究!
为何植物原生质体解离这么难?
相较于动物,植物由于细胞壁的限制,很难获得高活率的原生质体,极大限制了植物单细胞研究。那你知道为何植物原生质体解离这么难吗?
1、首先与植物细胞本身结构特征有关。植物坚固的细胞壁保护着幼嫩的原生质体,在原生质体解离过程中需要通过酶解法去除细胞壁,脱离了这层保护壳,脆弱的原生质体极易破裂;
2、其次与植物组织特点有关。如果研究对象非植物的幼嫩部位或者取材过程中不慎取到损伤和老化组织,在前处理过程中原生质体在各种应激压力下都容易受到损伤,导致活率下降和碎片率增加;
3、最后,与计数方式有关。一般动物细胞分离后采用台盼蓝染色或AO/PI荧光染料计数法,根据活细胞和死细胞细胞膜的通透性不同,对细胞进行染色计数。然而对于植物样本来说,台盼蓝染料对原生质体有一定的毒害作用,加入样本溶液后会额外增加死亡率,造成计数不准;而植物原生质体由于各种细胞内色素的存在,使用荧光染料计数时也会造成标记的偏差,影响活率的统计。此时结合镜检观察细胞形态,对活率和碎片率进行客观评价,也许我们的工作又可以往前更进一步。
千里之行,始于足下
植物单细胞转录组万里长征的第一步,从解离合格的原生质体开始!开泰在单细胞领域长期投入研发力量,即使在许多人望而却步的植物领域,也迎难而上。针对不同特点的样本类型制定个性化的实验处理方案,稳定高效的获得了近百例植物组织的原生质体悬液。同时也汇总了不同组织类型的解离难点及解决方案。
1. 植物茎部组织:
一般在解离植物茎部组织时,受茎部结构影响,比如茎上绒毛、茎内螺纹导管的存在,解离时原生质体悬液中会出现大量碎片,纯化难度较高(由于原生质体较脆弱易破碎,过度纯化又会导致细胞数量大量损失)。因此纯化体系是否合适,操作的熟练度,对能否获得高质量的原生质体至关重要。开泰研发团队在不断测试摸索中,总结出一套完善的纯化体系,通过差速离心、密度梯度离心等方式尽量去除碎片;同时加强自身操作手法,可快速获得多种茎组织的高质量原生质体悬液。
实例展示:
2. 植物根:
受限植物根本身结构,根的原生质体制备也有一定难度。根尖部位生命活动旺盛,但其他部分可解离出的原生质体较少,并且解离过程中会产生较多组织碎片,影响单细胞悬液纯度,上机后还容易造成堵孔。因此,在方案设计允许的范围内,可尽量在幼嫩时期(初生根),未长出侧根之前进行取样。而解离过程中也需要更加注意,可以采取适当减弱酶强度、选取正确的离心转速、温柔的吹打方式等来减少损伤 。
实例展示:
3. 植物花瓣部位:
植物花瓣部位可能会由于本身色素存在,解离后影响AO/PI荧光计数,导致计数或活率测量不准确,需结合镜下进行校准。
4. 植物子房和果实:
植物子房原生质体悬液中会出现直径过大的细胞(可能是胚原细胞),但数量不多,需过筛去除。植物果实解离测试发现,属于假果类的瓠果比浆果类果实解离出的原生质体更纯净。成熟度越高,果实内部成分越复杂,解离难度越大。
实例展示:
5. 植物叶片:
相较于其他部位而言,植物叶片取样的时间范围更宽裕一些,通过对植物样本质地的判断选择不同的酶液组合进行解离。同时原生质体中叶绿体存在也会对countstar荧光计数有所影响,需结合镜下进行综合评定。
实例展示:
产品优势
开泰生物长期专注于高通量单细胞多组学的技术研发与服务,单细胞悬液制备经验丰富,可根据物种及组织部位提供定制化解决方案,稳定高效的完成大多数组织样本的单细胞解离,保证单细胞数据产出,结合成熟的生信分析,流畅的沟通平台,为单细胞科研保驾护航!
解离经验
开泰依靠强大的实验研发团队,成功解离了近百例植物组织样本,拥有丰富的植物原生质体制备经验。
欢迎各位老师垂询,每位老师都有机会获得样本的免费解离测试机会哦~
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