English文献解读|Int J Mol Sci（6.208）：二轻杨梅素抑制宫颈癌细胞迁移和侵袭
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论文ID
原名：Dihydromyricetin Inhibited Migration and Invasion by Reducing S100A4 Expression through ERK1/2/β-Catenin Pathway in Human Cervical Cancer Cell Lines
译名：二氢杨梅素通过ERK1/2/β-Catenin通路降低S100A4表达抑制人宫颈癌细胞的迁移和侵袭
期刊：International Journal of Molecular Science
影响因子：6.208
发表时间：2022.12.01
DOI号：10.3390/ijms232315106
背 景
宫颈癌是女性第四大常见癌症，90%以上癌症患者死于癌细胞转移，虽然癌症转移是癌症治疗失败和死亡的主要原因，但人们对其仍然知之甚少。S100A4是钙结合蛋白S100家族的一员，发现于1989年。S100蛋白参与许多细胞功能，如增殖、分化、凋亡、钙稳态、代谢、炎症和运动。据报道，S100A4通过促进现有肿瘤细胞的运动和侵袭，从而影响转移，导致侵袭性转移。因此，S100A4是多种类型肿瘤的主要预后指标。二氢杨梅素（DHM，C15H12O8），是大黄酮的一种成分，是一种类黄酮化合物，具有抗炎、抗氧化、抗高血压、降血糖、保肝、抗癌和抗转移作用。然而，DHM对宫颈癌影响的分子机制尚不清楚。因此，本研究检测了具有潜在抗转移特性的DHM在体外DHM处理的HeLa和SiHa人宫颈癌细胞中的作用，以研究该过程的信号通路。
实验设计
结 果
01
DHM影响宫颈癌细胞活性、转移和侵袭
首先，为了评估DHM对宫颈癌细胞的抗转移作用，作者使用不同浓度的DHM处理Hela和SiHa细胞24小时，MTT测定法分析，结果表明对宫颈癌细胞无毒性作用。并进行了伤口愈合和Boyden腔室测定，结果表明DHM以浓度依赖性方式抑制宫颈癌细胞的转移（图1），显著减少了宫颈癌细胞的转移和侵袭（图2）。
图1 DHM对宫颈癌细胞系细胞活力和伤口愈合测定的影响
图2 DHM对宫颈癌细胞系细胞迁移和侵袭的影响
02
DHM降低宫颈癌细胞中的 S100A4 基因表达
接着为了鉴定用DHM处理后调节的靶基因，作者用DHM（0和100μM）对HeLa细胞系进行了RNA测序分析（图3 A）。并进行了实时PCR分析和蛋白质印迹测定以验证S100A4的RNA测序结果，发现DHM以浓度依赖性方式抑制宫颈癌细胞中的S100A4表达（图3 B，C）。随后，Boyden腔室测定表明S100A4过表达显著促进了HeLa细胞和SiHa细胞的迁移（图3 D，E）。此外，作者通过调节S100A4基因研究了DHM对人类宫颈癌细胞爬行能力的影响。用CS2空载体或CS2-S100A4转染HeLa细胞和SiHa细胞24小时，然后用DHM（0和100μM）处理。Boyden测定结果表明，DHM降低了S100A4过表达，也就是说，S100A4在HeLa和SiHa细胞中的表达均降低（图4 A，B）。结果表明，DHM通过调节宫颈癌细胞中的S100A4水平介导细胞迁移。
图3 DHM对宫颈癌细胞系中S100A4表达的影响
图4 S100A4在宫颈癌细胞系中的过表达
03
DHM通过ERK100A4降低ERK1/2/β-Catenin通路的表达来抑制细胞迁移
作者通过蛋白质印迹测定发现DHM抑制宫颈癌细胞中β-Catenin表达和GSK3β磷酸化，而DHM对Wnt 3和Wnt 11表达没有明显影响（图5），此外，在DHM处理后，β-Catenin的成核也受到抑制。随后作者研究了DHM是否可以降低ERK1 / 2，JNK1 / 2和p38三种主要的丝裂原活化蛋白激酶的活化。此外，用 T-BHQ预处理 HeLa 细胞系 1 小时，再用 100 μM DHM 处理 24 小时，然后用蛋白质印迹测定和 Boyden 测定进行分析。结果表明，T-BHQ逆转了DHM在β-Catenin和S100A4和细胞迁移（图5）。
图5 DHM对β-Catenin、对p-GSK3β和MAPK通路水平的影响
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结 论
作者发现用DHM治疗宫颈癌可以通过ERK1 / 2 / β-Catenin通路调节S100A4表达来抑制细胞迁移和侵袭。DHM通过ERK1/2通路调节β-Catenin的易位能力，从而影响靶标S100A4的性能，最终抑制宫颈癌细胞的迁移能力。此研究为限制S100A4诱导的细胞运动和转移提供了一种新的选择。因此，DHM可能作为未来辅助治疗的潜在治疗靶点。
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